關(guān)于病毒檢測(cè)需要了解的內(nèi)容有哪些?
發(fā)布時(shí)間:2021-07-23
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病毒的理化特性鑒定是病毒鑒定的重要依據(jù),一般進(jìn)行病毒核酸類(lèi)型鑒定、耐酸性試驗(yàn)、脂溶劑敏感試驗(yàn)、胰蛋白酶敏感試驗(yàn)等。病毒檢測(cè)是抗病毒產(chǎn)品一般指產(chǎn)品通過(guò)添加抗病毒材料,對(duì)病毒結(jié)構(gòu)中的一個(gè)元素進(jìn)行修飾,使其無(wú)法復(fù)制,起到對(duì)病毒殺滅的效果。那么病毒檢測(cè)的內(nèi)容有哪些呢?
病毒檢測(cè)方法有哪些?
病毒檢測(cè)的分離與培養(yǎng):主要有細(xì)胞培養(yǎng)法、雞胚培養(yǎng)法、動(dòng)物接種法等,而對(duì)細(xì)胞、雞胚不敏感,又沒(méi)有合適動(dòng)物模型的病毒,可采用基因克隆的方法。
1、細(xì)胞培養(yǎng)法:二倍體細(xì)胞株來(lái)源于正常人胎兒組織,主要用于培養(yǎng)病毒制備等;原代細(xì)胞是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞,原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和后立即進(jìn)行培養(yǎng);傳代細(xì)胞來(lái)源于細(xì)胞或細(xì)胞株傳代過(guò)程中變異的細(xì)胞。
2、雞胚培養(yǎng):雞胚培養(yǎng)法是用來(lái)培養(yǎng)某些對(duì)雞胚敏感的動(dòng)物病毒的一種培養(yǎng)方法,此方法可用以進(jìn)行多種病毒的分離、培養(yǎng),勒的滴定,中和試驗(yàn)以及抗原和的制備等。
3、動(dòng)物接種:常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有、乳鼠、、家兔猴和雞等;常用的接種途徑包括皮下、皮內(nèi)、腹腔、靜脈、角膜、鼻腔及腦內(nèi)接種等方式。
病毒檢測(cè)形態(tài)學(xué)檢查及診斷
1、光學(xué)顯微鏡:直接觀察到較大的病毒體(如痘病毒)、包涵體狂犬病毒感染一一嗜酸性包涵體。
2、掃描電子顯微鏡:用于觀察病毒和表面結(jié)構(gòu)和附屬結(jié)構(gòu)等。
3、透射電子顯微鏡:用于觀察病毒的大小、形態(tài)與結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)的*微結(jié)構(gòu)等。
病毒檢測(cè)核酸分子法
1、基因芯片:基因芯片(gene chip)又稱(chēng)基因微矩陣(DNAmicroarry)具有微型化、高通量、并行處理易于自動(dòng)化等優(yōu)越性,它將大量的靶基因片段有序、高密度地排列在玻片、硅等載體上,用熒光檢測(cè)后,通過(guò)計(jì)算機(jī)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)比較和分析,一次試驗(yàn)就可對(duì)上萬(wàn)種基因進(jìn)行快速準(zhǔn)確、的檢測(cè)。
2、實(shí)時(shí)熒光定量PCR: 目前有效、靈敏的方法就是實(shí)時(shí)熒光定量PCR ( real time RT-PCR ) ,根據(jù)目標(biāo)核酸基因來(lái)設(shè)計(jì)引物實(shí)現(xiàn)對(duì)靶標(biāo)的檢測(cè),已廣泛應(yīng)用在樣品的檢測(cè)。real time RT-PCR是將熒光能量傳遞技術(shù)應(yīng)用于PCR儀中,在PCR的反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用**的熒光信號(hào)積累來(lái)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,終通過(guò)得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知得模板進(jìn)行定量分析的方法。
病毒檢測(cè)指標(biāo)
?。?)病毒增殖的觀察:
病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的鑒定指標(biāo):
1、細(xì)胞形態(tài)的改變;
2、紅細(xì)胞吸附;
3、細(xì)胞培養(yǎng)液pH值改變;
?。?)病毒數(shù)量趿病毒感染性測(cè)定:
1、血凝試驗(yàn);
2、中和試驗(yàn);
3、空斑形成試驗(yàn);
4、半數(shù)感染量(ID50)和組織培養(yǎng)半數(shù)感染量( TCID50 )。
中科檢測(cè)具有開(kāi)展病毒檢測(cè),新冠病毒檢測(cè),新冠病毒殺滅試驗(yàn)的生物安全等級(jí)2級(jí)(P2實(shí)驗(yàn)室),可開(kāi)展消毒器械,消毒劑,抗菌材料等產(chǎn)品的病毒滅活驗(yàn)證試驗(yàn)。
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