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抗菌劑抗菌性能檢測(cè)指標(biāo):靜菌力和殺菌力評(píng)價(jià)方法介紹
發(fā)布時(shí)間:2024-10-29 66

  抗菌劑指能夠在一定時(shí)間內(nèi),使某些微生物(細(xì)菌、真菌、酵母菌、藻類(lèi)及病毒等)的生長(zhǎng)或繁殖保持在必要水平以下的化學(xué)物質(zhì)??咕鷦┛咕阅艿暮门c否可以從兩方面來(lái)判斷即各文獻(xiàn)中分類(lèi)的抑菌作用(即靜菌力)與殺菌作用(即殺菌力)。因此,抗菌劑抗菌性能傳統(tǒng)檢測(cè)方法中,包括靜菌力評(píng)價(jià)與殺菌力評(píng)價(jià)兩方面的內(nèi)容。




  作為第三方檢測(cè)中心,中科檢測(cè)機(jī)構(gòu)擁有CMA和CNAS認(rèn)證檢測(cè)資質(zhì),檢測(cè)設(shè)備齊全,數(shù)據(jù)科學(xué)可靠,可出具國(guó)家認(rèn)可的抗菌劑抗菌性能檢測(cè)報(bào)告。


  抗菌劑抗菌性能檢測(cè):靜菌力


 ?。?)靜菌力大多數(shù)情況下采用電導(dǎo)率法或者 MIC 法來(lái)評(píng)價(jià)。


  電導(dǎo)率法:在不補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)液的情況下,細(xì)菌在生長(zhǎng)過(guò)程中,會(huì)逐步消耗營(yíng)養(yǎng)液中的蛋白質(zhì),提取其所需的物質(zhì)而放出有機(jī)酸和氨基酸兩種電解質(zhì)。因此,細(xì)菌生長(zhǎng)越快,由于沒(méi)有外來(lái)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的加入,營(yíng)養(yǎng)液中電解質(zhì)濃度就越大,其導(dǎo)電性也越好,電導(dǎo)率也就越大。將沒(méi)有加入抗菌劑的營(yíng)養(yǎng)液作為參照物,一定時(shí)間內(nèi),對(duì)比加入抗菌劑營(yíng)養(yǎng)液電導(dǎo)率的變化趨勢(shì),能夠有效地反應(yīng)抑菌作用的大小。


  MIC法:MIC是指使阻礙細(xì)菌發(fā)育所需的抗菌劑的最小濃度。MIC值越小,抗菌劑的靜菌活性越大,即表示抗菌劑的抑菌作用越好。MIC測(cè)定有兩種方法,其一是液體稀釋法。取一沒(méi)有接種細(xì)菌的空白營(yíng)養(yǎng)液作為參照物,使用營(yíng)養(yǎng)液連續(xù)稀釋抗菌劑,將細(xì)菌接種到已稀釋抗菌劑的營(yíng)養(yǎng)液,觀察營(yíng)養(yǎng)液的渾濁情況。當(dāng)出現(xiàn)與空白營(yíng)養(yǎng)液透明度相當(dāng)?shù)臐舛葧r(shí),此時(shí)抗菌劑的濃度即為其MIC值。二是固體稀釋法,也叫培養(yǎng)基法。先傾倒培養(yǎng)基,然后將混有不同濃度抗菌劑的細(xì)液體涂布到培養(yǎng)基上,恒溫下放置一天,觀察開(kāi)始沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)的最小濃度即為其MIC值。


  抗菌劑抗菌性能檢測(cè):殺菌力


  殺菌力可以用直接計(jì)數(shù)、滅菌率和抑菌圈三種方法來(lái)評(píng)價(jià),在各方法的測(cè)定檢測(cè)時(shí),因?yàn)榭咕牧闲螒B(tài)與檢測(cè)操作的不同,所以檢測(cè)手段也會(huì)有很多種。


  試驗(yàn)中常用的也是最直觀表現(xiàn)殺菌性能的就是抑菌圈指標(biāo)-抑菌環(huán)法。激活細(xì)菌,使其達(dá)到對(duì)數(shù)期,此時(shí)用滅菌生理鹽水調(diào)節(jié)其濃度到108個(gè)ml,然后與營(yíng)養(yǎng)液混合,傾倒在培養(yǎng)皿中,一同固化成試驗(yàn)平板,把實(shí)驗(yàn)所需的抗菌劑加工成圓盤(pán),緊貼平板置于平板中央。37℃下培養(yǎng)18h后,在圓盤(pán)的周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)的空白圓環(huán)(抑菌圈),測(cè)量抑菌圈直徑的大小,與標(biāo)準(zhǔn)圓壞對(duì)比,評(píng)價(jià)抗菌材料殺菌力。


  抗菌劑抗菌性能檢測(cè):操作步驟


  本實(shí)驗(yàn)分別采用抑菌圈法和 MIC法來(lái)表征樣品的殺菌力和靜菌力。


  將已高溫滅菌的 LB 瓊脂培養(yǎng)基加熱到完全融化,快速的倒在培養(yǎng)皿內(nèi),每個(gè)培養(yǎng)皿 15ml,待其完全凝固。此外,將融化的LB 瓊脂培養(yǎng)基冷卻到50℃左右(溫度不可過(guò)高,會(huì)殺死細(xì)菌,又不可過(guò)低,要不然培養(yǎng)基將重新凝固)混入試驗(yàn)菌,將混有菌的培養(yǎng)基5ml加到已凝固的培養(yǎng)基上待凝固(上層)。


  在無(wú)菌操作環(huán)境下,在混合培養(yǎng)基表面直接垂直放上牛津杯(內(nèi)徑6mm、外徑 8mm、高10 mm 的圓形小管,已高溫滅菌),輕輕加壓,使其與培養(yǎng)基緊密接觸,在牛津杯中加入待檢抗菌劑樣品,牛津杯一般情況下可以裝240微升,勿使其外溢。加滿(mǎn)后置37℃培養(yǎng)16-18小時(shí),觀察結(jié)果,抑菌用尺直接量就可以。在培養(yǎng)中,一方面試驗(yàn)菌開(kāi)始生長(zhǎng),另一方面抗生素呈球面擴(kuò)散,離杯越近,抗生素濃度越大,離杯越遠(yuǎn)抗生素濃度越小。隨著抗生素濃度減小,有一條最低抑菌濃度帶,在帶范圍內(nèi),菌不能生長(zhǎng),而呈透明的圓圈,這就叫“抑菌圈”??股貪舛仍礁?,抑菌圈越大。


  本實(shí)驗(yàn)采用培養(yǎng)基法來(lái)測(cè)定其最小抑菌濃度。


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